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- 光度计物理学的UV法实现
- 点击次数：2674 更新时间：2013-09-30
- 光度计是一种实用性较强且测试准确的光学分析仪器，在平时测试过程原理当中需要用到例如UV法来实现一些光度上的测量。光度计的UV法是在280nm波长，直接测试蛋白与测试核酸类似，要求A280的吸光值至少大于0.1A，*的线性范围在1.0-1.5 之间。实验中选择Warburg 公式显示样品浓度时，发现读数“漂移”。这是一个正常的现象。事实上，只要观察A280的吸光值的变化范围不超过1%，表明结果非常稳定。
选择Warburg 公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质，一般要消除320nm 的“背景”信息，设定此功能“开”。
漂移的原因是因为Warburg 公式吸光值换算成浓度，乘以一定的系数，只要吸光值有少许改变，浓度就会被放大，从而显得结果很不稳定。蛋白质直接定量方法，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。对于紫外线来说可以之间定量法相对于比色法来说速度会更加快，操作也较为简便，可以更加容易受到平行物质的干扰，例如DNA的干扰就是其中之一，此外敏感度也是一方面因素，要求上来说蛋白的浓度会高一些，所以光度计的UV法是一种光度计中*的一个物理学技术。原载：http://www.aoe-sh.com/news.html