1.仪器自身因素

 

　　（1）光源稳定性

 

　　UV紫外光度计通常采用氘灯（紫外区）和钨灯（可见区）作为光源。如果光源老化或供电不稳，会导致光强波动，从而影响吸光度的测量精度。

 

　　优化建议：

 

　　-定期检查光源寿命，氘灯一般使用1000小时后需更换。

 

　　-确保电源稳定，避免电压波动影响光强输出。

 

　　（2）光路系统与检测器

 

　　光路系统的污染（如灰尘、指纹）或检测器（如光电倍增管、CCD）老化均会影响光信号的准确接收。

 

　　优化建议：

 

　　-定期清洁比色皿窗口和光学元件。

 

　　-避免长时间高灵敏度检测，防止检测器疲劳。

 

　　（3）波长准确性

 

　　波长偏差会导致测量峰位偏移，影响定量分析结果。

 

　　优化建议：

 

　　-定期使用标准物质（如钬玻璃）校准波长。

 

　　-选择具有自动波长校准功能的仪器。

 

　　2.样品因素

 

　　（1）样品浓度

 

　　根据朗伯-比尔定律，吸光度（A）应在0.2~0.8范围内线性最佳。过高浓度（A>1.0）可能导致光散射或偏离线性关系。

 

　　优化建议：

 

　　-稀释高浓度样品，使其吸光度落在最佳测量区间。

 

　　-使用更短光程的比色皿（如1mm代替10mm）降低吸光度。

 

　　（2）溶剂与背景干扰

 

　　溶剂本身的紫外吸收（如苯在254nm有强吸收）或样品中的杂质（如颗粒物、气泡）会干扰测量。

 

　　优化建议：

 

　　-选择低紫外吸收的溶剂（如超纯水、甲醇）。

 

　　-离心或过滤去除悬浮颗粒，避免气泡干扰。

 

　　（3）比色皿的影响

 

　　比色皿的材质（石英vs.玻璃）、洁净度及匹配性（不同比色皿间的透光率差异）均会影响测量结果。

 

　　优化建议：

 

　　-紫外区必须使用石英比色皿（玻璃会吸收UV光）。

 

　　-使用前用乙醇或稀酸清洗，避免指纹或残留污染。

 

　　3.环境与操作因素

 

　　（1）温度波动

 

　　温度变化可能影响样品稳定性（如酶活性）或溶剂折射率，导致基线漂移。

 

　　优化建议：

 

　　-在恒温实验室中使用仪器，避免阳光直射。

 

　　-对温度敏感样品，使用带温控的比色皿架。

 

　　（2）杂散光

 

　　杂散光（非目标波长的光）会降低信噪比，尤其在低波长（<220nm）下影响显著。

 

　　优化建议：

 

　　-选择光学系统优化的仪器（如双单色器设计）。

 

　　-避免在强光环境下操作，必要时加遮光罩。

 

　　（3）操作误差

 

　　-基线校正不当：未使用空白溶剂校准，导致背景扣除不准确。

 

　　-比色皿放置错误：光路未对准，或比色皿外壁沾有液体。

 

　　优化建议：

 

　　-每次测量前用空白溶剂调零。

 

　　-使用比色皿时保持光面清洁，并确保方向一致。

 

　　4.数据处理与校准

 

　　-软件算法：积分方式（峰高vs.峰面积）影响定量结果。

 

　　-校准曲线：标准曲线拟合方式（线性vs.二次方程）影响准确性。

 

　　优化建议：

 

　　-采用多点校准，确保线性范围覆盖样品浓度。

 

　　-定期验证仪器性能，使用标准物质（如重铬酸钾）检查吸光度准确性。